Главная |
Выделение иммуноглобулина E (IgE)Принцип метода Иммуноглобулин Е можно выделить из сыворотки больных аллергическими заболеваниями с помощью ионообменной хроматографии на ДЭАЭ-целлюлозе и гель-фильтрации на сефадексе G-200. Сыворотки больных IgE-продуцирующей миеломой встречаются крайне редко и практически не используются в качестве исходного материала. Ограниченное применение находит получение IgE из сыворотки аллергиков методом иммуноадсорбции. Получение IgE из сыворотки больных с аллергией Проводят осаждение сульфатом аммония при насыщении 0,5 и рН 7,0. Осадок диализируют против 0,005 М фосфатного буфера с рН 8,0 и хроматографируют на ДЭАЭ-целлюлозе. Элюиро-вание проводят ступенчатым градиентом фосфатного буфера 0,005 М, 0,01 Ми 0,025 М с рН 8,0. Последний буфер элюирует обогащенную IgE-фракцию, которая может быть подвергнута дополнительной очистке на сефадексе G-200. IgE обнаруживается в восходящей части пика. Путем повторной хроматографии на сефадексе G-200 удается освободиться от большей части IgG. Выделение IgE из сыворотки больных с миеломой Для выделения IgE из сыворотки больных миеломой используют метод препаративного электрофореза, фракционирование сульфатом натрия (180 г/л) и гель-фильтрацию на сефадексе G-150. Можно также использовать осаждение сульфатом аммония (0,5 насыщения), хроматографию на ДЭАЭ-сефадексе А-50 и гель-фильтрацию на сефадексе G-200.
|
|