Главная

• Аллергия
• Клиническая иммунология
• Антитела
• Реакция антиген-антитело
• Клетки иммунной системы
• История иммунологии
• Иммунохимия
• Продукты на страже иммунитета
• Вакцины
• Общие и частные проблемы иммунологии
• Основы иммунологии

Иммунохимический анализ гибридомных антител

Типирование гибридомных антител должно проводиться на возможно более ранних стадиях (смотри раздел "Определение моноклональных антител к растворимым антигенам при помощи радиоиммунологического анализа"). Изотип связавшихся с ПВХ-листами антител определяют путем проявления меченной ¹²⁵[I]-антисывороткой к тотальному препарату иммуноглобулина или к различным тяжелым цепям (μ., γ₁, γ₂a, γ₂b, γ₃α).

Определение класса (субкласса) гибридомных антител при помощи меченных ¹²⁵[I]-антител к иммуноглобулинам

Как правило используют большое количество метки (до 150000 имп/50 мкл) в отличие от экспериментов с высокоочищенными антителами. Биохимическими методами изотип можно определять путем электрофореза в полиакриламидном геле (ПААГ) с додецилсульфатом натрия (ДСН), разделяя восстановленные моноклональные антитела. Единообразие антител может быть подтверждено с помощью электрофореза и изоэлектрофокусирования иммуноглобулин получивших витальную метку ¹⁴С.

Основное преимущество моноклональных антител (МКАТ) — их специфичность. Правда, сама природа взаимодействия антиген-антитело может обуславливать иногда возникновение перекрестных реакций и с моноклональными антителами. Еще одной отличительной чертой моноклональных антител является их молекулярная однородность и доступность в относительно больших количествах при сравнительно низкой себестоимости. Поскольку гибридомы теоретически бессмертны и легко культивируются после хранения в замороженном состоянии, они могут быть использованы для получения долгосрочно воспроизводимых результатов. Моноклональные антитела открывают новые перспективы в таких областях исследования как изучение антигенов клеточных мембран (антигены дифференцировки и антигены, ассоциированные с опухолями).