Материалы, оборудование, подготовка стеклянной посуды
Материалы и оборудование
Для работы необходимы: однополые мыши инбредных штаммов СВА, С57bl или DBA в
возрасте 8—12 недель;
эритроциты барана в растворе Олсвера или в дефибринированной
крови;
чашки Петри диаметром 50 мм (Anumbra, Венгрия);
колбы Эрленмейера
объемом 25, 100, 500 и 1000 мл;
градуированные пипетки (1, 10 и 25 мл);
подставки для пипеток;
пипетки для подсчета эритроцитов и лейкоцитов;
стеклянный
стерилизующий фильтр G5 (Saale — Glas, Иена, ГДР);
стеклянные стаканы объемом на
400 мл;
центрифужные пробирки (10 и 20 мл);
камеры для подсчета клеток по Biirker и Thoma;
силиконовые пробки для колб Эрленмейера;
шприцы (10 мл) с
иглами № 16;
алюминиевая фольга;
бунзеновская горелка; ножницы;
пинцеты;
формы
для льда;
чашки с замороженным льдом с плоской поверхностью льда;
среды Игла-MEM
и Хенкса в сухом виде (Государственный институт иммунопрепаратов и питательных
сред, Берлин);
сыворотка плода коровы (например, «Rehatuin» Reheis Chemical
Company, Phoenix USA);
заменимые аминокислоты: Ser, Pro, Gly, Asp кислота (x.
ч., или для культуры тканей);
L-глютамин, х. ч.; пируват натрия, х. ч.;
пенициллин, стрептомицин 2-меркаптоэтанол (Koch-Light, Англия);
NaHCО3;
2,5% раствор трипанового синего в 0,15 М NaCl;
тридистиллированная вода;
сухожаровой шкаф,
термостат,
настольная центрифуга,
микроскоп,
весы (тарирующие);
баллоны со сжатым воздухом, содержащим 7,5% СО2;
эксикатор диаметром 40 см;
лабораторное помещение,
приспособленное для
стерильных работ.
Подготовка стеклянной посуды
Работы по культивированию требуют строгого соблюдения стерильности; можно
использовать только безупречно чистые посуду и растворы. Стеклянную посуду
ополаскивают водопроводной водой и кипятят в течение часа в растворе моющих
средств. После повторного ополаскивания посуду замачивают в 20% серной кислоте
не менее чем на 6 ч. Затем посуду тщательно моют водопроводной водой и дважды
ополаскивают дистиллированной водой. Лабораторное стекло высушивают в сушильном
шкафу при 100 °С до исчезновения воды и пятен конденсации пара, после чего
посуду заворачивают в алюминиевую фольгу и стерилизуют 2 часа при 180 °С.
Подготовленную таким образом посуду хранят в помещении, предназначенном для
стерильных работ.
|
