Главная

• Аллергия
• Клиническая иммунология
• Антитела
• Реакция антиген-антитело
• Клетки иммунной системы
• История иммунологии
• Иммунохимия
• Продукты на страже иммунитета
• Вакцины
• Общие и частные проблемы иммунологии
• Основы иммунологии

Разнообразие гаметных F-областей генов тяжелых цепей

Ряд исследователей приступил к изучению локуса генов V_H в гаметном состоянии. Гивол и др. при помощи V_H-зонда, полученного из клона кДНК МРС11, провели скрининг библиотеки ДНК эмбрионов мыши и обнаружили несколько сильно гибридизующихся клонов. Было показано, что два из них содержат по две последовательности V_H с промежутком между ними около 7 и 12 тпн. Последовательность трех из этих генов была определена так же, как последовательность четвертого гена из другого клона. Оказалось, что исследованные гены соответствуют одной из пяти подгрупп, на которые разделены аминокислотные последовательности V_H мыши (подгруппа VHII), и на 80—90% гомологичны зонду МРС11. Эти данные подтверждают, что родственные V_H-гены расположены в хромосоме вблизи друг от друга. Интересно, что три из четырех проанализированных генов, по-видимому, неспособны к экспрессии; один из них несет мутацию, разрушающую инициирующий кодон AUG, а два других — терминирующие кодоны в одной фазе с рамкой считывания. Возможно, эти гены играют некоторую роль в создании разнообразия, участвуя в межгенной рекомбинации или генной конверсии. Однако более вероятно, что они представляют собой неизбежные «отходы», возникающие при необходимости поддерживать составленную многими копиями родственных генов «библиотеку», часть которой может экспрессироваться с достаточно низкой интенсивностью, и давление отбора в сторону сохранения «правильности» таких генов окажется низким. В любом случае, присутствие таких псевдогенов в заметных количествах означает, что при «подсчете генов», основанном на числе наблюдаемых при переносе по Саузерну полос, число функциональных генов можно переоценить.

Сравнивая с помощью блоттинга по Саузерну ДНК миеломы МОРС104Е и гаметную ДНК (из печени), Рехави и др. смогли установить, что подгруппа генов VHII расположена с 5'-стороны от подгруппы VHIII. Миелома МОРС104Е гаплоидна по генам Н-цепи и продуцирует миеломный белок VHII-IgM. При сравнении результатов блоттинга ДНК миеломы МОРСЮ4Е и печени с использованием зондов VHII и VHIII (полученных из клона кДНК тяжелой цепи S107) оказалось, что в клетках МОРСЮ4Е отсутствует весь набор генов VHIII, но сохраняются все полосы VHII, имеющиеся в гаметной ДНК. Если считать, что делеция возникает вследствие F-Z)-J-рекомбинации, то полученный результат означает, что гены семейства VHIII лежат между рекомбинировавшими VHII- и J-генами, располагающимися вблизи С_μ, тогда как остальные гены VHII могут избежать делеции в том случае, если они располагаются с 5'- стороны от рекомбинировавшего гена. Такой подход должен оказаться полезным для дальнейшей работы по картированию генов. Другим потенциально полезным подходом для картирования локуса VH может служить соотнесение данных блоттинга по Саузерну с классическими маркерами идиотипов и аллотипов. Бен-Нериа и др. использовали зонды VHII для блоттинга ДНК из 16 линий миелом. Полученные ими результаты в целом хорошо коррелируют с Igh-аллотипом, а выявившиеся различия могут даже оказаться полезными (например, содержать информацию о гаметной рекомбинации между генами V_H и С_H).