Главная

• Аллергия
• Клиническая иммунология
• Антитела
• Реакция антиген-антитело
• Клетки иммунной системы
• История иммунологии
• Иммунохимия
• Продукты на страже иммунитета
• Вакцины
• Общие и частные проблемы иммунологии
• Основы иммунологии

Исследования in vivo

В конце 60-х — начале 70-х гг. в большинстве работ, посвященных функционированию макрофагов, использовалась модель иммуногенности макрофагов in vivo. Макрофаги инкубировали с радиоактивно меченным антигеном (например, с ¹³¹I-гемоцианином) и через разное время после инкубации вводили сингенным реципиентам, исследуя их способность индуцировать синтез антител. Часть макрофагов инкубировали in vitro, и через разное время определяли количество ¹³¹I-меченого антигена, остающегося в клетках или выделяемого в среду. Антигены вначале связывались с клеточной поверхностью, а затем поглощались в составе мембранных пузырьков и быстро подвергались катаболизму. Около 80% антигена, первоначально связавшегося с клеткой, деградировало; большая часть катаболизированного антигена позднее обнаруживалась в культуральной среде в виде ¹³¹I-аминокислот.

Судьба ¹³¹I-гемоцианина после поглощения макрофагами

В то же время оставшиеся 20% связанного клетками антигена избегали первоначальной деградации и оставались ассоциированными с клетками.

Связанный с клетками пул можно было разделить на три фракции:

Судьба антигена в макрофагах

От 3 до 7% исходно связавшегося с клетками белка выделялись макрофагамив среду. Появление этих продуктов не было связано с отщеплением гемоцианина, ассоциированного с клеточной поверхностью, поскольку их образование не подавлялось обработкой поверхности макрофагов трипсином. В то же время эти продукты были гетерогенны по размеру, что указывает на вызванные макрофагами изменения в строении молекулы. Большая часть выделяемого материала сохраняла способность реагировать с антителами. Секреция антигена происходила преимущественно в первые два часа после его поглощения. Из макрофагов также медленно выделялось небольшое количество антигена, столь же иммуногенного, как и нативная молекула. Возможно, эта часть секретируемого антигена возникала из внутриклеточного пула в результате экзоцитоза фагосом, возвращавшихся к клеточной поверхности. Второй пул антигена находился внутри клеток и медленно распадался. Между количеством распавшегося антигена и его иммуногенностью не было обнаружено корреляции. В случае с гемоцианином иммуногенность связанного с макрофагами антигена была относительно стабильной в течение нескольких дней, в то время как большая часть антигена катаболизировалась. Третья часть связанного с клетками антигена располагалась на клеточной поверхности и представляла собой небольшое число молекул, оставшихся связанными с мембраной после поглощения большей части антигена. Примерно 1 % исходно связанного с клетками белка сохранялся на поверхности клеток, но затем постепенно терялся. Хотя роль этих поверхностно-связанных компонентов не известна, показано, что инкубация макро-фагов с антителами к антигену или с трипсином перед введением клеток животному заметно снижала их иммуногенность.

Действие антител к антигену и трипсина на инкубированные с антигеном макрофаги

Этот результат позволил Унэнью и Цероттини постулировать, что иммуногенная детерминанта вовсе не является процессированным фрагментом и что мембрана макрофагов служит тем местом, где некоторые молекулы антигена избегают деградации и сохраняют свою исходную структуру.